Förståelse av etiologin bakom acquired equine polyneuropathy via studier av Schwanncellkulturer

Förvärvad ekvin polyneuropati (acquired equine polyneuropathy, AEP) är en förödande neurologisk sjukdom som drabbar nordiska hästar. Sjukdomen är associerad med karakteristiska histopatologiska förändringar i de perifera nerverna hos hästar. Dessa inkluderar remyelinisering och demyelinisering samt hypertrofi av perikaryon och proteinrika inlagringar (inklusioner) i de myelinproducerande Schwann-cellerna. Hypotesen är att en okänd faktor, möjligen från grovfoder, stör Schwann-cellernas metabolism.

Bakgrunden till studien var att nervstudier vore värdefulla för att klarlägga etiologin, men tillgången till nervprover är begränsad eftersom proverna måste tas i direkt anslutning till avlivning. Transport till patologiska enheter är oftast inte möjlig på grund av de allvarliga kliniska symptomen, vilket gör insamlade prover mycket värdefulla.

Projektets huvudmål var därför att skapa en robust plattform för att kunna studera de histopatologiska förändringarna i Schwannska celler (SC) hos hästar drabbade av AEP.  Cellkulturer från friska och sjuka hästar skulle etableras och jämföras under olika förhållanden. Cellkulturer möjliggör nedfrysning och upptining för vidare studier. 

En metod för odling av SC från häst etablerades. Nervprover från 10 friska och 3 sjuka hästar togs ut. Flödescytometri användes för att skilja mellan SC och fibroblaster. Celler från friska hästar inkuberades med serum från friska och sjuka hästar för att studera möjlig stressrespons. Serum från 6 hästar som var sjuka i AEP under projektperioden samt från en serumbank med friska och sjuka hästar analyserades med ELISA för IgG- och IgM-antikroppar mot specifika gangliosider. Immunfluorescens och immun-elektronmikroskopi av fryssnitt från nerver undersöktes för påvisning av gangliosiderna GM1 och GM2.

Odling av SC från friska och sjuka hästar var framgångsrik och vi kunde frysa ned sådana cellkulturer. Preliminära resultat från studier där cellkulturer inkuberats med serum från friska och sjuka hästar tyder på ökad celldöd vid användning av serum från sjuka hästar. Hästar från stall med AEP har högre nivåer i serum av IgM-antikroppar mot specifika gangliosider än friska hästar. Vi påvisade gangliosiderna GM1 och GM2 i hästnerver.

Vi har nu etablerat metoderna och har en bank med material för att upprepa försöken med fler kombinationer av friska och sjuka nervceller och serum. Vidare studier av antikroppar mot gangliosider i nerver från sjuka hästar kan ge information om en potentiell autoimmun roll i etiologin bakom AEP.  Fortsatta studier kommer att genomföras på cellkulturen från den sjuka hästen med inklusioner i SC.

Metoden för uttag av nervprov i fält möjliggör cellkulturer från fler AEP-drabbade hästar. Förhöjda nivåer av IgM-antikroppar mot gangliosider behöver undersökas vidare, men har potential att bli en biomarkör för AEP på stallnivå.

Åk till toppen